离心分离样品梯度回收方法之一---倾倒法

时间:2018-08-06    来源:湖南凯达科学仪器有限公司    点击量:475

离心分离样品梯度回收方法之一---倾倒法

    用凯达离心机分离样品结束后,必须收集梯度中的样品以便进一步分析,因此需要对梯度进行分级取样,在分级过程中要保护离心时得到的分离度。一般有直接收集和连续收集。
下面介绍直接回收区带之倾倒法
该方法适用于差速离心。普通的医用离心机离心沉淀或差速离心后,悬浮液就简单地分为上清液与沉淀两个部分。所谓倾倒法就是将上清液倾倒出来,使上清液与沉淀分开,从上清液或沉淀中取得所要求收取的样品部分。该法的特点是简单、快捷、方便。

在这种直接取沉淀或上清液的离心分离中,如果形成的沉淀不“密实”,倾出上清液时,沉淀有时也会被倒出,有时沉淀与上清液发生重新混合。为了使上清液与沉淀分得清楚,可用提高转速、增加离心力的方法使沉淀聚结得密实。这种做法有时往往并不可行,如果离心力过高,样品在上清液中会造成失去;如果样品存在于沉淀中,过分结实的沉淀可能会造成部分样品的不可逆聚集、黏结,不能重新分散悬浮;当转速高、离心力很大时,大分子间的内力受到影响如氢键作用等,样品在离心管底部形成坚硬的饼块。这种情况下要根据样品中杂质存在的形式、结构组成、s值大小来设置选择转速。倾倒上清液时应该顺沉淀形成的位置,倾倒时动作应该尽量地稳、尽量避免摇晃。如下图(如果沉降不够密实,尽可能用吸管吸出上清液)。

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